Zofenopril antitumor activity in mice bearing Ehrlich solid carcinoma: Modulation of PI3K/AKT signaling pathway

Angiotensin-II (AgII) is thought to be crucial for tumor growth and progression. Moreover, hydrogen sulfide (H2S) performs a controversial action in cancer pathology. Zofenopril (ZF) is an angiotensin-converting enzyme (ACE) inhibitor with H2S donating properties. Hence, this study aims at investigating the tumor suppressor activity of ZF and elucidating the involved trajectories in Ehrlich's solid tumor (EST)-bearing mice. EST was induced by the intradermal injection of Ehrlich's ascites carcinoma cells into femoral region. All parameters were assessed after 28 days post-inoculation or one-week thereafter. ZF treatment resulted in significant reduction of tumor weights with marked decrease in IL-6 and VEGF levels in serum, and tumor Ag II and CEA contents. Additionally, the administration of ZF downregulated the tumor gene expression of cyclin-D, ACE-1, and Bcl2 and upregulated the proapoptotic gene, BAX. Moreover, ZF increased CBS gene expression, which is a major contributor to cellular H2S production. In addition, ZF was able to reduce the protein expression of PI3K, pAKT, pGSK-3ß, and NFκB. Our study has provided novel insights into the possible mechanisms by which ZF may produce its tumor defeating properties. These intersecting trajectories involve the interference between PI3K/Akt and CBS signaling pathways

Efecto de los antagonistas de los receptores AT1 de la angiotensina II sobre la enfermedad periodontal inducida por inyecciones de lipopolisacáridos en ratas / Effect of ang II AT1 receptor antagonists, on periodontal disease induced by injections of lipopolysaccharide in rats

La Enfermedad Periodontal (EP) es una condición inflamatoria progresiva que afecta los tejidos que soportan y rodean a los dientes. Las endotoxinas bacterianas como los lipopolisacáridos (LPS), inducen una cascada inflamatoria causando resorción ósea mediante la producción y modulación de la red de citoquinas del tejido periodontal, del sistema RANK-RANKL-OPG y de la producción de especies reactivas del oxígeno (ERO). Siendo la vía final la activación del factor de transcripción NFκB para el control de la infección. Se sabe que el Sistema Renina Angiotensina (SRA) esta involucrado en la inflamación. Estas acciones pro-inflamatorias de la Ang II son producidas por la activación de NFkB mediante los receptores AT1, y por la generación de ERO. Nuestro objetivo fue determinar si la inhibición del receptor AT1 con el uso del valsartán reduciría la respuesta inmunitaria innata inflamatoria en un modelo de EP inducida por las inyecciones de LPS en la encía de las ratas. Nuestros resultados demuestran que el Valsartán disminuyó la leucocitosis sistémica, la movilidad dentaria, atenuó la pérdida de peso corporal de las ratas, disminuyó la formación de enzimas antioxidantes y NOS, redujo la producción y liberación de citocinas pro inflamatorias y aumentó las citocinas antinflamatorias, disminuyó la activación de p-p38, p-NFkB y la expresión de los receptores TLR4. El Valsartán también revirtió los efectos del LPS sobre la resorción ósea ya que disminuyó el número de osteoclastos, la expresión de los receptores RANK/RANKL/OPG y la relación RANKL/OPG y aumentó los depósitos de calcio y colágeno. Los mecanismos por los cuales el Valsartán reduce los efectos inflamatorios producidos por el LPS no están claras, pero la interferencia del ensamblaje de la NAD(P)H oxidasa con apocinina y el Tempol, indica que el Valsartán puede interferir con los pasos para el reconocimiento de LPS y su asociación con TLR4. Concluyéndose que las ERO participan en la señalización intracelular de la ANG II, vía el AT1R. Este estudio ayuda a dilucidar el papel del SRA en procesos inflamatorios. Además contribuye con sus resultados a ofrecer una alternativa terapéutica en el tratamiento de la EP.

Efeitos cardiovasculares da transferência adotiva de linfócitos T reguladores em camundongos submetidos à infusão crônica de angiotensina II e de aldosterona / Cardiovascular effects of adoptive transfer of regulatory T lymphocytes in mice submitted to chronic infusion of angiotensin II and aldosterone

A angiotensina (Ang) II e aldosterona induzem hipertensão arterial por mecanismos em parte mediados pela imunidade adaptativa, envolvendo linfócitos T auxiliares respondedores (Tresp). Os linfócitos T reguladores (Treg) são capazes de suprimir os efeitos pró-inflamatórios do sistema imune. O presente estudo avaliou se a transferência adotiva de Treg é capaz de prevenir a hipertensão e a lesão vascular induzidas pela AngII ou pela aldosterona, em dois protocolos distintos. No protocolo com Ang II, camundongos machos C57BL/6 sofreram a injeção endovenosa de Treg ou Tresp, sendo depois infundidos com Ang II (1ug/kg/min), ou salina (grupo controle) por 14 dias. No protocolo com aldosterona, um outro conjunto de animais sofreu injeções de Treg ou Tresp, sendo depois infundido com aldosterona (600ug/kg/d) ou salina (grupo controle), pelo mesmo intervalo de tempo. O grupo tratado com aldosterona recebeu salina 1% na água. Tanto o grupo Ang II como aldosterona apresentaram elevação da pressão arterial sistólica (43% e 31% respectivamente), da atividade da NADPH oxidase na aorta (1,5 e 1,9 vezes, respectivamente) e no coração (1,8 e 2,4 vezes, respectivamente) e uma redução da resposta vasodilatadora à acetilcolina (de 70% e 56%, respectivamente), quando comparados com os respectivos controles (P<0,05). Adicionalmente, a administração de Ang II proporcionou um aumento rigidez vascular (P<0,001), na expressão de VCAM-1 nas artérias mesentéricas (P<0,05), na infiltração aórtica de macrófagos e linfócitos T (P<0,001) e nos níveis plasmáticos das citocinas inflamatórias interferon (INF)-y, interleucina (IL)-6, Tumor necrosis factor (TNF)-a e IL-10 (P<0,05). Ang II causou uma queda de 43% no número de células Foxp3+ no córtex renal, enquanto que a transferência adotiva de Treg aumentou as células Foxp3+ em duas vezes em comparação com o controle. A administração de Treg preveniu o remodelamento vascular induzido pela aldosterona, observado na relação média/lúmen...

Angiotensin (Ang) II and aldosterone (aldo) induce hypertension through mechanisms in part mediated by adaptive immunity and T responder lymphocytes. T regulatory (Treg) lymphocytes suppress pro-inflammatory mediators of the immune system. We questioned whether Treg adoptive transfer will blunt Ang II or aldo-induced hypertension and vascular injury, by evaluating two distinct protocols. In the Ang II protocol, male C57BL/6 mice were injected i.v. with Treg or T responder cells, and then infused with Ang II (1ug/kg/min) or saline, for 14 days. In the aldosterone protocol, another set of animals was injected with Treg or T responder cells, and then infused with aldosterone (600ug/kg/d) or saline, for the same period. The aldosterone group received saline 1% in drinking water. Both Ang II and aldosterone treated mice presented an increase in systolic blood pressure (43% and 31% respectively), of NADPH oxidase activity in aorta (1.5 and 1.9 fold, respectively) and heart (1.8 and 2.4 fold respectively) and an impaired vasodilatory response do acetylcholine (by 70% and 56% respectively), when compared to their controls (P<0.05). In addition, Ang II administration resulted in increased vascular stiffness (P<0.001), mesenteric artery vascular cell adhesion molecule (VCAM-1) expression (P<0.05), aortic macrophage and T cell infiltration (P<0.001), and the plasma levels of the inflammatory cytokines INF-y, IL-6, TNF-a, and IL-10 (P<0,05). And II caused a 43% decrease in the number of Foxp3+ cells in the renal cortex, while Treg adoptive transfer increased Foxp3+ cells 2-fold compared to control. Treg administration prevented aldosterone-induced vascular remodelling, as observed by media to lumen ratio and media cross sectional area analysis of mesenteric arteries (P<0,05). All the above were prevented by Treg but not by T responder cell adoptive transfer. These results demonstrate that Treg suppress Ang II of aldo-mediated vascular injury and BP elevation...

AT1-receptor mediated vascular damage in myocardium, kidneys and liver in rats / Lesão vascular mediada pelo receptor AT1 esses efeitos em miocárdio, rins e fígado de ratos

The systemic aspect of vascular damage induced by angiotensin II (ANG II) has been poorly explored in the literature. Considering the presence of ANG II and its specific receptor AT1, in several organs, all tissues might be potentially affected by its effects. The aims of this study were: To evaluate the early histological changes in the heart, liver and kidneys, produced by ANG II infusion, to evaluate the protective effect of losartan. Wistar rats were distributed into three groups: control (no treatment), treated with ANG II, and treated with ANG II + losartan. ANG II was continuously infused over 72 hours by subcutaneous osmotic pumps. Histological sections of the myocardium, kidneys and liver were stained and observed for the presence of necrosis. There were ANG II-induced perivascular inflammation and necrosis of the arteriolar wall in the myocardium, kidney, and liver by, which were partially prevented by losartan. There was no significant correlation between heart and kidney damage. Tissue lesion severity was lower than that of vascular lesions, without statistical difference between groups. ANG II causes vascular injury in the heart, kidneys and liver, indicating a systemic vasculotoxic effect; the mechanisms of damage/protection vary depending on the target organ; perivascular lesions may occur even when anti-hypertensive doses of losartan are used.

O aspecto sistêmico da lesão vascular induzida pela angiotensina II (ANG II) tem sido pouco explorada na literatura. Considerando a presença de ANG II e de seu receptor AT1 em diversos órgãos, todos os tecidos poderiam ser potencialmente afetados por esses efeitos. Os objetivos deste estudo foram: avaliar as alterações histológicas iniciais no coração, fígado e rins, produzidas pela infusão de ANG II, e avaliar o efeito protetor do losartan. Ratos Wistar foram divididos em três grupos: controle (sem tratamento), tratados com ANG II, e tratados com ANG II + losartan. A ANG II foi infundida continuamente por 72 horas por meio de mini-bombas osmóticas. Foram realizados cortes histológicos de miocárdio, rim e fígado para coloração e observação para a presença de necrose. Observou-se a presença de inflamação perivascular e necrose de parede arteriolar em miocárdio, rins e fígado, que foram parcialmente prevenidas pelo losartan. Não houve correlação significante entre as lesões observadas no coração e nos rins. A severidade da lesão tissular foi menor quando comparada às lesões vasculares, sem diferença estatística entre os grupos. A ANG II causa injúria vascular no coração, rins e fígado, sugerindo um efeito vasculotóxico sistêmico; os mecanismos de lesão/proteção variam dependendo do órgão afetado; as lesões perivasculares podem ocorrer mesmo quando doses antihipertensivas de losartan forem utilizadas.

AT1-receptor mediated vascular damage in myocardium, kidneys and liver in rats / Lesão vascular mediada pelo receptor AT1 esses efeitos em miocárdio, rins e fígado de ratos

The systemic aspect of vascular damage induced by angiotensin II (ANG II) has been poorly explored in the literature. Considering the presence of ANG II and its specific receptor AT1, in several organs, all tissues might be potentially affected by its effects. The aims of this study were: To evaluate the early histological changes in the heart, liver and kidneys, produced by ANG II infusion, to evaluate the protective effect of losartan. Wistar rats were distributed into three groups: control (no treatment), treated with ANG II, and treated with ANG II + losartan. ANG II was continuously infused over 72 hours by subcutaneous osmotic pumps. Histological sections of the myocardium, kidneys and liver were stained and observed for the presence of necrosis. There were ANG II-induced perivascular inflammation and necrosis of the arteriolar wall in the myocardium, kidney, and liver by, which were partially prevented by losartan. There was no significant correlation between heart and kidney damage. Tissue lesion severity was lower than that of vascular lesions, without statistical difference between groups. ANG II causes vascular injury in the heart, kidneys and liver, indicating a systemic vasculotoxic effect; the mechanisms of damage/protection vary depending on the target organ; perivascular lesions may occur even when anti-hypertensive doses of losartan are used.

O aspecto sistêmico da lesão vascular induzida pela angiotensina II (ANG II) tem sido pouco explorada na literatura. Considerando a presença de ANG II e de seu receptor AT1 em diversos órgãos, todos os tecidos poderiam ser potencialmente afetados por esses efeitos. Os objetivos deste estudo foram: avaliar as alterações histológicas iniciais no coração, fígado e rins, produzidas pela infusão de ANG II, e avaliar o efeito protetor do losartan. Ratos Wistar foram divididos em três grupos: controle (sem tratamento), tratados com ANG II, e tratados com ANG II + losartan. A ANG II foi infundida continuamente por 72 horas por meio de mini-bombas osmóticas. Foram realizados cortes histológicos de miocárdio, rim e fígado para coloração e observação para a presença de necrose. Observou-se a presença de inflamação perivascular e necrose de parede arteriolar em miocárdio, rins e fígado, que foram parcialmente prevenidas pelo losartan. Não houve correlação significante entre as lesões observadas no coração e nos rins. A severidade da lesão tissular foi menor quando comparada às lesões vasculares, sem diferença estatística entre os grupos. A ANG II causa injúria vascular no coração, rins e fígado, sugerindo um efeito vasculotóxico sistêmico; os mecanismos de lesão/proteção variam dependendo do órgão afetado; as lesões perivasculares podem ocorrer mesmo quando doses antihipertensivas de losartan forem utilizadas.

Efeitos cardiovasculares da infusão de angiotensina II durante 14 dias em ratos: aspectos hemodinâmicos, ecocardiográficos e histológicos / Cardiovascular effects of infusion of angiotensin II for 14 days in rats: hemodynamic, achocardiographic and histologic changes

A angiotensina II (ANG II) é o principal componente do sistema renina angiotensina-aldosterona. Este peptídeo quando ativado cronicamente, é associado a efeitos deletérios ao sistema cardiovascular. Vinte e dois ratos Wistar foram divididos em dois grupos, com 11 animais cada. Metade dos animais tiveram minibombas de ANG II implantadas no subcutâneo, recebendo a dose de 150ng/min durante 14 dias e os restantes serviram como controle. Foram avaliadas alterações hemodinâmicas, ecocardiográficas e histológicas. Foi possível mostrar vários efeitos agressivos induzidos pela ANG II no miocárdio. Os animais que receberam ANG II apresentaram peso menor (p=0,0004), elevação de pressão arterial (p=0,0002), aumento da cavidade ventricular esquerda (DDVE, p = 0,007; PPVE, p = 0,01) hipercinesia ventricular ( por cento delta D, p = 0,001; FE, p = 0,01), aumento do peso do coração normalizado para o peso corpório (p = 0,036) e maior massa ventricular ( p = 0,025) quando comparados aos animais-controle. Na análise histológica observaram-se lesões perivasculares inflamatórias e necróticas em ambos os ventrículos. As lesões induzidas pela ANG II foram fundamentalmente perivasculares em ambos os ventrículos. Entre os grupos, não houve diferença significativa quanto aos níveis séricos de troponina I. Estes resultados sugerem que os animais provavelmente estavam na fase compensada de insuficiência cardíaca e que a lesão induzida pela ANG II, deve-se, em parte, aos seus efeitos vasculotóxicos, visto que as artérias coronárias do ventrículo direito, que não estava sofrendo sobrecarga de pressão, também estavam afetadas, e levantam a possibilidade de insuficiência vascular coronariana como mecanismo de lesão tissular tardia...

The hyperglycemia induced by angiotensin II in rats is mediated by AT1 receptors

We have shown that the renin-angiotensin system (RAS) is involved in glucose homeostasis during acute hemorrhage. Since almost all of the physiological actions described for angiotensin II were mediated by AT1 receptors, the present experiments were designed to determine the participation of AT1 receptors in the hyperglycemic action of angiotensin II in freely moving rats. The animals were divided into two experimental groups: 1) animals submitted to intravenous administration of angiotensin II (0.96 nmol/100 g body weight) which caused a rapid increase in plasma glucose reaching the highest values at 5 min after the injection (33 per cent of the initial values, P<0.01), and 2) animals submitted to intravenous administration of DuP-753 (losartan), a non-peptide antagonist of angiotensin II with AT1-receptor type specificity (1.63 µmol/100 g body weight as a bolus, iv, plus a 30-min infusion of 0.018 µmol 100 g body weight-1 min-1 before the injection of angiotensin II), which completely blocked the hyperglycemic response to angiotensin II (P<0.01). This inhibitory effect on glycemia was already demonstrable 5 min (8.9 ñ 0.28 mM, angiotensin II, N = 9 vs 6.4 ñ 0.22 mM, losartan plus angiotensin II, N = 11) after angiotensin II injection and persisted throughout the 30-min experiment. Controls were treated with the same volume of saline solution (0.15 M NaCl). These data demonstrate that the angiotensin II receptors involved in the direct and indirect hyperglycemic actions of angiotensin II are mainly of the AT1-type.